Monitorización de la respuesta inmune inducida en pacientes con cáncer de mama sin sobreexpresión de HER2 tras el tratamiento estándar combinado con vacunas de células dentríticas pulsadas con lisados tumorales autólogos

Abstract

El cáncer de mama (CM) constituye el cáncer más frecuente en mujeres, así como la principal causa de muerte por cáncer. La mortalidad ha disminuido en los últimos años, sobre todo debido a una detección precoz, y a nuevas terapias sistémicas más individualizadas. Sin embargo, a pesar de la innovación terapeútica, un tercio de las pacientes potencialmente curables siguen recayendo y fallecen. Dada la implicación del sistema inmune en el desarrollo y en el control de los tumores, en los últimos años, se ha puesto especial interés en el desarrollo de estrategias de inmunoterapia. Una de las posibles estrategias de inmunoterapia es la vacunación con células dendríticas (CDs). Se han llevado a cabo numerosos ensayos clínicos con estas vacunas y se puede concluir que esta estrategia es segura, bien tolerada y que no produce efectos adversos importantes. En el año 2010 se inició en la CUN un ensayo clínico con vacunas de CDs autólogas combinadas con el tratamiento estándar en pacientes con CM localizado sin sobreexpresión de HER2 (TN y luminales) para evaluar el posible efecto sinérgico de la inmunoterapia activa con el tratamiento estándar (NCT01431196). El protocolo de este ensayo consiste en tratamiento convencional para estos tumores (quimioterapia secuencial neoadyuvante con antraciclinas en dosis densas y taxanos, cirugía, radioterapia ± hormonoterapia) más vacuna de CDs autólogas maduras pulsadas con lisado tumoral autólogo. En este ensayo se reclutaron 22 pacientes, de las cuales 20 pacientes fueron evaluables. El objetivo de esta tesis es monitorizar la respuesta inmune en sangre periférica inducida por el tratamiento combinado. Para ello, se utilizaron muestras de suero y células mononucleadas aisladas de sangre periférica (PBMCs) obtenidas en diferentes momentos del tratamiento. Se realizó caracterización fenotípica de las PBMCs, estudio del patrón de citoquinas en suero, determinación de anticuerpos frente a antígenos tumorales, ensayos in vitro de reestimulación de PBMCs y estudio del repertorio TCR de linfocitos T (LT). Para analizar los resultados, las pacientes se clasificaron en 2 grupos en función de la respuesta clínica alcanzada: muy buena respuesta clínica (MBRC) (grado IV/V Miller&Paine tumor; A/D/- ganglios linfáticos centinela), y no muy buena respuesta clínica cuando no alcanzan esta respuesta. El 35% de las pacientes fueron clasificadas como MBRC. Los resultados de la caracterización fenotípica mostraron que las pacientes MBRC presentaban basalmente mayores niveles de LT CD4 efectores y memoria efectora y menor expresión de LAG3 en LT CD4 y CD8. Al analizar los cambios inducidos por el tratamiento en todas las pacientes se observó una disminución porcentual de LT, con aumento de linfocitos B, aumento de células NK CD16, disminución de LT reguladores y de células mieloides supresoras, aumento de HLADR en LT CD4 y CD8, y disminución de PD1 y TIM3 en LT CD8. Los resultados de las citoquinas mostraron que las pacientes MBRC presentaban mayor concentración basal de IL1b e IL7, y una disminución significativa de IFNg e IL6 en todas las pacientes con el tratamiento. En los resultados de respuesta celular específica se observó aumento de proliferación linfocitaria por ensayo de incorporación de timidina tritiada y de células productoras de IFNg mediante ELISPOT con el tratamiento. Este comportamiento se daba en un mayor número de pacientes MBRC, y en el caso de la proliferación, en más pacientes con subtipo TN. Se detectó respuesta humoral en el 50% de las pacientes. Por último, los resultados del repertorio TCR mostraron que las pacientes MBRC presentaban mayor diversidad basal de TCR, y que el tratamiento inducía una expansión oligoclonal. Todos estos resultados sugieren que las pacientes con MBRC presentan un sistema inmunológico más preparado basalmente y que el tratamiento combinado produce una activación de este sistema, acompañada por una disminución de los mecanismos reguladores.